Benzonase Nuclease高活力全能核酸酶
——纯度>90%,酶活>250U/μL,无内毒素,无标签
1. 产品简介
全能核酸酶,又称广谱核酸酶,英文名称Benzonase Nuclease,一种来源于Serratia Marcescen的基因工程酶。它可以降解所有形式的DNA和RNA,包括单链、双链、线状、环状、天然以及变性的核酸,将它们消化成3-8个碱基长度的5-单磷酸寡核苷酸,且不具有碱基识别特异性。另外,全能核酸酶在非常广泛的条件下(6M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)都能保持很高的稳定性和消化活力,非常适用于作为各类科学研究以及疫苗、蛋白、多糖类制药工业的首选酶制剂,去除样本或制品中的核酸残留,提升样本纯度和制品生物功效。
图1 全能核酸酶结构图
2. 产品应用
1)用于除去生物制品中的DNA/RNA
美国FDA对治疗用每剂量的生物制品的核酸含量要求为低于10 pg,国内对此相应的要求为低于100 pg。全能核酸酶可用于疫苗、多糖、蛋白等工业生物制品中核酸的去除,使生物制品的最终核酸含量符合要求,同时提高生物制品功效。
2)用于降低细胞破碎后的粘度
全能核酸酶可以降解所有形式的核酸,降低细胞裂解液的粘度,提高蛋白得率,改善分离效果,使之易于过滤(尤其是超滤),利于下游层析纯化操作。
图2 细胞裂解液Benonase处理(A)和未处理(B)比较图
3)用于细胞培养来源产物的纯化过程
核酸很容易粘附在病毒样颗粒(VLP)、病毒粒子、包涵体等细胞生成颗粒的表面,使颗粒大小或电荷发生改变,造成这些颗粒的聚集,如外周血单细胞(PBMC)存放过程中的结块现象。全能核酸酶可有效降解核酸,避免核酸对细胞产物的影响以及纯化效率,利于提高细胞产物纯化效率。
4)用于生化分析样品的制备
在ELISA、色谱分析、双相电泳和足迹分析等过程中,用全能核酸酶处理含有核酸的蛋白样品,可提高分辨率,并提高回收率。
图3 小鼠脑核蛋白Benonase处理(A)和未处理(B)双向电泳比较图
3. 产品性质
表1 产品性质表
英文别名(English Synonym) | BenzNuclease; Universal Nuclease; Benzonase endonuclease |
CAS号(CAS NO.) | 9025-65-4 |
分子量(Molecular Weight) | 27.9 kDa |
来源(Source) | 真核酵母表达 |
标签(Tag) | 无标签 |
纯度(Purity) | ≥90%(SDS-PAGE) |
酶活(Enzyme Activity) | ≥250 U/μL |
比活(Specific Activity) | ≥1.0×106 U/mg蛋白 |
蛋白酶(Protease) | |
内毒素(Endotoxin) | Undetected(鲎试剂法) |
最适pH(Optimum pH) | 8.0(工作范围pH 6-10) |
最适温度(Optimum Temperature) | 37℃(工作范围0-42℃) |
辅助因子(Cofactor) | 1-10 mM Mg2+ |
储存缓冲液(Storage Buffer) | 20 mM Tris-Cl pH8.0,2 mM MgCl2,2 mM NaCl,50%甘油 |
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